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                                      今天是2019年6月2日 星期日,欢迎光临本站 星紫(上海)新材料技术开发有限公司 网址: www.fhui.icu

                                      行业新闻

                                      量子点标记实现活细胞内单拷贝艾滋病毒基因的原位成像

                                      文字:[大][中][小] 2017-5-12    浏览次数:1159    
                                      量子点标记实现活细胞内单拷贝艾滋病毒基因的原位成像

                                       

                                      艾滋病毒基因组RNA逆转录为DNA,整合在宿主染色体内形成前病毒(HIV provirus),是根除艾滋病毒的最大障碍。在活细胞内对单拷贝或低拷贝的整合态HIV基因标记与成像,对前病毒的识别和切除具有重要意义,但一直是个难题。最近,中国科学院武汉病毒研究所研究?#36125;?#23447;强与中国科学院生物物理研究所研究员张先恩合作,利用量子点标记转?#25216;?#27963;子样效应因子(TALEs)探针,在活细胞内单拷贝基因荧光标记与成像方面取得突破,实现了单拷贝整合态HIV前病毒DNA原位标记、动态成像和3D定位分析。研究成果于5月8日在《自然-通讯》(Nature Communications)在线发表,马英新和王明秀为论文的共同第一作者。
                                       
                                      研究人员?#32043;?#35774;计筛选了特异性识别HIV-1前病毒基因的TALE识别元件。基于反式环?#26009;═CO2)与四?#28023;═z1)的生物正交反应,以及链霉亲和素(SA)与生物素(Biotin)的特异性结合反应,建立活细胞内针对TALEs的量子点标记技术。通过“时-空耦合”设计,利用不同类型的生物正交反应,获得不同颜色量子点标记的TALE探针。量子点-TALE探针特异性标记整合在染色体上的HIV前病毒DNA,实现了活细胞内单拷贝整合态前病毒DNA原位标记与成像。在整合HIV前病毒DNA的潜伏感染细胞中,可以对HIV 前病毒进行实时动态示踪和3D定位分析,并测定单细胞内整合态前病毒的数目。
                                       
                                      该研究实现了活细胞内单拷贝整合态HIV基因的荧光标记与成像,对于HIV前病毒的高灵敏特异识别和原位分析,以及病毒整合与潜伏感染等关键机制的研究和理解均具有重要意义。所建立的量子点-TALE探针单基因识别技术,也可以用于其他与疾病和细胞功能相关的?#25105;?#21333;拷贝基因的荧光标记与影像分析,为染色体内单基因定位、功能结?#36141;?#26102;空动态等研究提供了技术手段。
                                       

                                      该研究得到了国家自然科学基金、中科院青年创新促进会、中科院重点项目等基金项目的资助。?#26412;?#21270;工大学参与了该项研究。(来源:中科院武汉病毒研究所)


                                      作者:崔宗强等 来源:《自然—通讯》
                                      论文链接
                                       
                                       
                                      单拷贝HIV整合态前病毒DNA原位标记与成像

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